【目的】为提高α-淀粉酶的分泌，将不同天然信号肽的N、H和C区进行组合，以期筛选出优于天然信号肽的嵌合信号肽。【方法】首先从天然信号肽库中筛选了适合解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）α-淀粉酶在枯草芽孢杆菌（B. subtilis）中分泌的天然信号肽，以其中4种天然信号肽（SPyvcE、SPyoqM、SPBglS和SPyobB）的H区替换信号肽SPsacB的H区，构建4种嵌合信号肽RSP1-RSP4指导α-淀粉酶的基因工程菌株。【结果】结果表明，适合α-淀粉酶的最适天然信号肽和嵌合信号肽分别为SPyoqM和RSP1，且RSP1指导α-淀粉酶在枯草芽孢杆菌的分泌效率较SPyoqM提高27%，较具相同H区的SPyvcE提高20.9倍，较仅H区不同的SPsacB提高2.07倍。【结论】嵌合信号肽是一种有效提高α-淀粉酶产量的方法，嵌合信号肽构建及筛选策略为其它蛋白质的高效分泌提供了指导。